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熒光原位雜交(Fluorescence In Situ Hybridization,F(xiàn)ISH)技術(shù)是一種重要的分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)。
原理:基于堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,用熒光標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交。
探針類型:
1. 染色體特異性重復(fù)序列探針:用于檢測(cè)染色體的數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常。
2. 全染色體或染色體區(qū)域特異性探針:可識(shí)別整條染色體或染色體的特定區(qū)域。
3. 位點(diǎn)特異性探針:針對(duì)特定基因位點(diǎn)設(shè)計(jì)。
主要步驟:
1. 樣本制備:包括細(xì)胞培養(yǎng)、涂片制備、固定等。
2. 探針制備:對(duì)探針進(jìn)行熒光標(biāo)記。
3. 雜交:將探針與樣本在適當(dāng)條件下雜交。
4. 漂洗:去除未結(jié)合的探針。
5. 檢測(cè):在熒光顯微鏡下觀察熒光信號(hào)。
應(yīng)用:
1. 醫(yī)學(xué)診斷:如腫瘤細(xì)胞的染色體異常檢測(cè),輔助疾病診斷和分型。
2. 產(chǎn)前診斷:檢測(cè)胎兒染色體異常。
3. 遺傳學(xué)研究:研究基因在染色體上的定位和表達(dá)。
優(yōu)點(diǎn):
1. 能在細(xì)胞水平上直觀顯示基因或染色體的位置和分布。
2. 相對(duì)快速、簡(jiǎn)便。
總之,熒光原位雜交技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)和生物學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。
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