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瑞氏-吉姆薩染色(Wright-Giemsa Staining)原理:
瑞氏染料由酸性染料伊紅和堿性染料亞甲藍(lán)組成。血紅蛋白、嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合呈紅色;細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性蛋白質(zhì),與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,呈紫藍(lán)色;中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,呈淡紫色。
吉姆薩染料由伊紅,天青組成,染色原理與瑞氏染色法基本相同。
瑞氏染色法對細(xì)胞漿內(nèi)的顆粒染色效果好,但對細(xì)胞核的染色不如吉姆薩染色法。吉姆薩染色法對細(xì)胞核著色好,但對胞漿顆粒著色較差,且有時對細(xì)胞核著色較深,核結(jié)構(gòu)顯示不佳。為兼顧二者之長,常用瑞氏-吉姆薩復(fù)合染色法。
用途和目的:常用于血液涂片、肺泡灌洗液涂片、骨髓細(xì)胞涂片、細(xì)菌、染色體、組織切片等的染色。標(biāo)本染色后,相應(yīng)各類細(xì)胞呈現(xiàn)不同的著色,從而達到辨別其形態(tài)特征的目的。
染色步驟:
1. 自來水流水緩慢沖洗晾干后的載玻片洗去載玻片上的雜質(zhì),注意流水從涂片上方流下,避免直接沖洗細(xì)胞;
2. 將載玻片晾干后置于瑞士染液中染色10min;
3. 盡量瀝干載玻片,再置于吉姆薩染液中染色4min。染色完畢后流水緩慢沖洗載玻片,將多余染液洗去;
4. 載玻片晾干后顯微鏡下觀察。
此法我們常用于小鼠肺泡灌洗液涂片的染色,其他標(biāo)本可以根據(jù)染色結(jié)果適當(dāng)調(diào)整染色時間。
顯微鏡下細(xì)胞的辨別:
紅細(xì)胞:平均直徑7μm,細(xì)胞呈粉紅至紅色,中央因雙凹圓盤結(jié)構(gòu)而呈現(xiàn)空白。
單核細(xì)胞:胞體圓至橢圓形,直徑12-20μm,胞漿灰藍(lán)色且稍有粗糙感,半透明似毛玻璃,胞質(zhì)中常有小空泡。成熟的單核細(xì)胞胞核呈腎形、馬蹄形、不規(guī)則形等,細(xì)胞核常有扭曲和折疊感。
淋巴細(xì)胞:分大(直徑12-15μm)、小(直徑6-9μm)兩大類,圓形或橢圓形,胞質(zhì)淡藍(lán)色透明,無顆粒或偶有數(shù)顆紫紅色的嗜天青顆粒。核圓形,直徑接近細(xì)胞直徑80%,染色質(zhì)呈濃集的團塊狀。
中性粒細(xì)胞:胞體圓形至橢圓形,直徑10-15μm。胞質(zhì)呈無色或極淺的淡粉紅色,彌散分布許多淺紅或淺紫的細(xì)小顆粒。細(xì)胞核形態(tài)多樣,可呈長桿狀,也可為分葉狀核,2-5葉不等,葉與葉間有細(xì)絲相連。
嗜酸性粒細(xì)胞:細(xì)胞直徑13-15μm,胞漿中充滿嗜酸性顆粒,顆粒粗大整齊,排列均勻緊密,為磚或鮮紅色。在染色較深的涂片中,顆粒呈現(xiàn)深橙、棕至咖啡色。細(xì)胞核分葉,多為兩葉呈眼鏡狀,顏色為深紫色,偶見3葉。
文章出自:瑞氏-吉姆薩染色實驗 想了解更多請關(guān)注:http://bjzjay.cn/
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