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天狼星紅染色(Siriusred):由于膠原呈堿性,與酸性染料起強烈反應(yīng)。天狼星紅就是一種很強的酸性染料,它可以和膠原纖維反應(yīng)使膠原纖維產(chǎn)生明顯的雙折光現(xiàn)象。天狼星紅染色膠原纖維呈紅色,胞核呈綠色,余呈黃色。
實驗步驟:??
1. 石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ10min-無水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。
2. 天狼猩紅染色液染色:切片入飽和枯萎蒜天狼猩紅染色液內(nèi)染色8min。
3. 漂洗:切片入無水酒精漂洗數(shù)分鐘,顯微鏡下觀察滿意為止。
4. 封片:切片于60°烤箱烤干后于二甲苯透明5min,中性樹膠封片。
5. 顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
6. 染色結(jié)果:光學(xué)顯微鏡下膠原纖維紅色,背景黃色。
注意事項:
1. 染液配制時,飽和枯萎蒜一定要過飽和,配制時要長時間攪拌后還有不溶的情況下才為飽和的。
2. 飽和天狼猩紅染液是一種兩色混合染液,兩種顏色同時都有作色能力,而且存在一定得制約平衡關(guān)系,所以染液在長期使用時隨著帶入的雜質(zhì)過多,可能會影響這種平衡關(guān)系,所以建議染色結(jié)果不對時,應(yīng)立即更換染液。
3. 天狼猩紅染色前,需要盡量將水甩干,避免多次染色后帶入較多的水分使染液的染色能力下降。
4. 染色后脫水時使用新的無水乙醇,并快速脫水,長時間脫水會影響染色結(jié)果。
5. 如果需要染核,可以先染完天狼猩紅后在用蘇木素染核。
文章出自:天狼星紅染色(Siriusred)實驗 想了解更多請關(guān)注:http://bjzjay.cn/
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