一、實驗原理 DAPI 為一種熒光染料，可以穿透細(xì)胞膜與細(xì)胞核中的雙鏈DNA結(jié)合而發(fā)揮標(biāo)記的作用，可以產(chǎn)生比DAPI自身強20多倍的 熒光，和EB相比，對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。顯微鏡下可以看到顯藍(lán)色熒光的細(xì)胞，熒光顯微鏡觀察細(xì)胞標(biāo)記 的效率高(幾乎為100 %) ，且對活細(xì)胞無毒副作用。DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀 檢測。 DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。細(xì)胞經(jīng)熱激處理后用DAPI染色3分鐘，在熒光顯微 鏡下可以看到到細(xì)胞核的形態(tài)變化。

二、實驗過程

1、用PBS按照1(原液)：5000(PBS)稀釋DAPI原液

2、吸去細(xì)胞怕片上的細(xì)胞培養(yǎng)基，PBS清洗三次（不能讓細(xì)胞干透）

3、用3.7%甲醛固定細(xì)胞10min

4、吸去固定劑，用PBS沖洗三次，每次5min

5、用0.2% Triton X-100使得細(xì)胞透化處理5min

6、吸去Triton，PBS清洗3次，每次5min

7、DAPI工作液室溫下染色1-5min

8、吸去工作液，PBS清洗三次。

9、成像

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