尼氏染色法操作步驟：

1.固定：可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福爾馬林溶液。

2.組織切片：石蠟切片7~10μm或25μm(見(jiàn)注意事項(xiàng)4)。

3.切片脫蠟入水。

4.用甲基紫染色液涂片，染色10~20min。

5.蒸餾水沖洗。

6.用NisslDifferentiation分化4~8s，直到大部分染色被消除。

7.直接經(jīng)無(wú)水乙醇至二甲苯，顯微鏡下觀察。

8.如果有必要，重復(fù)步驟6和7。重復(fù)時(shí)，給予少量NissolDifferentiation分化。

9.在二甲苯中充分沖洗。加拿大香脂或DPX封片。

尼氏染色法注意事項(xiàng)：

1.尼氏體離體后容易溶解，所以組織取出后應(yīng)立即固定，否則難以著色。

2.組織固定起著非常重要的作用，固定可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福爾馬林溶液。

3.本染色液對(duì)石蠟組織切片的尼氏染色效果較好。

4.如果要證實(shí)尼氏物質(zhì)的存在，那么染色后必須要用NissolDifferentiation分化。

5.石蠟切片厚度7～10μm或25μm(皮質(zhì)神經(jīng)元密度的評(píng)估要用25μm厚的切片)。

6.染色后的標(biāo)本務(wù)必避光保存，否則容易褪色。

7.主要由甲基紫染色液、分化液等組成。尼氏物質(zhì)呈紫黑藍(lán)色,神經(jīng)元呈淡紫藍(lán)色,細(xì)胞核呈紫藍(lán)色。

文章出自：尼氏染色實(shí)驗(yàn)      想了解更多請(qǐng)關(guān)注：http://bjzjay.cn/